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当前分类:JC-1染色
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实验介绍

JC-1染色是一种非常经典且实用的荧光染料技术,主要用于检测线粒体膜电位(Mitochondrial Membrane Potential, ΔΨm) 的变化。线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。

JC-1是一种亲脂性阳离子荧光染料,它能穿透细胞膜并选择性地进入线粒体。它具有浓度和电压依赖性的荧光颜色变化:在线粒体膜电位较高(正常健康线粒体)的情况下,JC-1会聚集在线粒体基质中,形成J-聚集体(J-aggregates)。这些聚集体会发出强烈的红色荧光(最大发射波长~590 nm)。在线粒体膜电位较低或丧失(凋亡或不健康线粒体)的情况下,JC-1不能在线粒体内聚集,而是以单体(Monomer) 的形式分散在细胞质中。这些单体会发出绿色荧光(最大发射波长~529 nm)。因此,颜色的变化直接反映了线粒体膜电位的变化。通过计算红/绿荧光强度的比值,可以定量地衡量线粒体去极化的程度,比值下降提示膜电位下降,细胞可能处于凋亡早期。

基于上述原理,JC-1染色在生物医学研究中有广泛的应用:

l   细胞凋亡的早期检测:这是JC-1最核心的应用。线粒体膜电位的崩溃是细胞凋亡早期且不可逆的事件,早于磷脂酰丝氨酸外翻(Annexin V检测)和细胞核的变化(如DNA断裂)。JC-1可以比Annexin V/PI双染法等更早地捕捉到凋亡信号。

l   线粒体功能与疾病机制研究:神经退行性疾病:研究阿尔茨海默病、帕金森病等模型中神经元细胞的线粒体损伤情况。

l   心血管疾病:评估心肌缺血再灌注损伤、心力衰竭等模型中心肌细胞线粒体的功能状态。

l   药物筛选与毒性评估,药物肝毒性/肾毒性评估,心脏安全性评价、纳米毒理学研究等多方面的应用。

JC-1原理图.png

实验方法

1. 细胞培养于造模

2. 诱导细胞凋亡

3. JC-1探针孵育

4. 镜下观察。

实验结果:

示例图

示例图.png

客户提供

1. 细胞及药物

2. 实验方案(处理条件及处理浓度)

结果交付

       细胞JC-1检测结果及实验报告。


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