蛋白保存条件选择

蛋白质在离开其天然环境后可能会变得不稳定。它们可能因蛋白水解、聚集和次优储存而失去活性。最佳储存条件取决于具体的蛋白质。

蛋白质稳定性的一般考虑因素，有关蛋白质稳定性的一般准则：

1.应该冻干蛋白质，还是将其保存在溶液中？

2.应该在什么温度下储存蛋白质？

3.应该如何溶解我的蛋白质？

冻干可以更稳定地长期储存；然而，蛋白质在使用前必须重新溶解。处理冻干肽和蛋白质时还需要考虑一些具体因素 。

溶液中的蛋白质储存更容易被微生物或蛋白水解降解。

我应该在什么温度下储存蛋白质？

在室温下储存蛋白质溶液会导致蛋白质降解和/或失活，这通常也是微生物生长的结果。

对于 短期 储存（几周），建议将蛋白质保存在 4 ° C下， 为了长期储存，我们建议将蛋白质保存在 -20 或 -80 ℃ 应避免重复冻融循环，这也会降低蛋白质稳定性。

应该如何溶解我的蛋白质？

浓度考虑因素，浓度低于 1 mg/mL 的溶液更容易发生蛋白水解或失活。由于在某些情况下浓度高于 1 mg/mL 可能不太现实，因此通常的做法是添加“载体”，例如纯化牛血清白蛋白 (BSA)，使其浓度达到 1 至 5 mg/mL (0.1%至 0.5%）。溶解过程必须小心地将蛋白质溶解在缓冲液中。剧烈摇动或搅拌（例如，使用涡流）会破坏生物活性。为了防止可能降解蛋白质样品的蛋白酶污染，必须使用手套。

应该确保将其溶解在适当的缓冲液中：酸性肽应储存在碱性缓冲液中，碱性肽应储存在酸性缓冲液中。如有必要，短暂超声处理。含有色氨酸、蛋氨酸或半胱氨酸的肽需要特别小心以避免氧化。可以使用无氧水或还原剂。为了储存，肽溶液应等分并冷冻保存在-20°C。大多数含有 Trp、Met、Cys、Asn 或 Gln 的肽的保质期有限。不建议长期存放