细胞凋亡-Tunel染色
细胞介绍
TUNEL 的中文全称是末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记。这个名称听起来很复杂，但我们可以将其拆解来理解：
TdT (Terminal deoxynucleotidyl Transferase)： 末端脱氧核苷酸转移酶。这是整个技术的核心酶，它具有一种独特的能力：不需要DNA模板，就可以将脱氧核苷酸直接连接到DNA链的3'-羟基末端上。
dUTP (Deoxyuridine Triphosphate)： 脱氧尿苷三磷酸，这是要被连接上去的核苷酸。在实验设计中，这个dUTP通常会被标记上（例如，用荧光素FITC或生物素标记），以便后续检测。
Nick End Labeling： 缺口末端标记。这里的“Nick”指的是DNA双链上出现的断裂。
核心原理：
在细胞凋亡（程序性死亡）的晚期阶段，细胞内的内源性核酸内切酶会被激活，这些酶会特异性地在核小体间切割基因组DNA，从而产生大量双链DNA断裂。这些断裂的DNA末端会暴露出大量的3'-OH末端。TUNEL技术正是利用了这一特征：将待检测的细胞或组织切片进行固定和预处理，增加细胞膜的通透性，让试剂能够进入。在载玻片上滴加反应混合液，其中就包含了TdT酶和标记好的dUTP（如FITC-dUTP）。TdT酶会识别这些暴露的3'-OH末端，并将带有标记物的dUTP不断地连接到这些末端上，形成一条长长的聚合物链。最后，通过相应的检测系统（如荧光显微镜直接观察FITC的绿色荧光，或通过辣根过氧化物酶HRP催化DAB产生棕色沉淀）来显示这些被标记的位点。
因此，在显微镜下，凡是发生DNA断裂（即凋亡）的细胞核，都会被特异性地标记上（发出荧光或呈现棕色），而正常细胞的细胞核则不会被标记。
实验流程
1. 细胞培养与造模；
2. 细胞凋亡诱导；
3. 细胞染色：固定、破膜和TdT标记等；
4. 显微镜观察。
数据分析
示例图
DOI:10.3892/ijmm.2015.2391
客户提供
1. 细胞及药物
2. 细胞涂片活切片
3. 实验方案（处理条件及处理浓度）
结果交付
细胞凋亡图片及实验报告。
