实验介绍
CCK-8法是检测细胞增殖和毒性应用最广泛的方法之一。其原理是CCK-8溶液采用高水溶性WST-8盐,它在电子载体1-Methoxy PMS的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比,CCK-8不能染色活细胞。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
CCK-8具有对细胞的毒性小;产生的甲瓒产物是水溶性的,无需换液,适合悬浮细胞;操作简便,无需提前配置;灵敏度高,线性范围宽,数据可靠,重现性好等优点。该技术常被用于细胞增殖/毒性测定、细胞活性测定、药物筛选及肿瘤药敏试验等。
图1 CCK-8作用原理图
实验流程
细胞增殖:
细胞毒性:
数据分析:
细胞活力(%)=[(As-Ab)/(Ac-Ab)] ×100
抑制率(%)=[(Ac-As)/(Ac-Ab)] × 100
As =实验孔的吸光度(细胞、培养基、CCK8 和测试化合物孔的吸光度)。
Ab =空白孔吸光度(含有培养基和 CCK8 的孔的吸光度)。
Ac =对照孔吸光度(含有细胞、培养基和 CCK8 的孔的吸光度)。
客户提供
1. 细胞及药物
2. 实验方案(处理条件及处理浓度)
结果交付
CCK8检测结果及实验报告。
技术交流