多蛋白复合物参与几乎所有细胞过程。蛋白质的功能不仅取决于其自身的理化性质,还取决于与其伴侣的相互作用状态及其特性。由于缺乏辅因子或翻译后修饰,异源蛋白质在原核生物中的表达有时会导致产生不溶性和非功能性产物。许多蛋白质复合物需要与其天然伴侣在宿主细胞中共表达才能获得正确的折叠、稳定性和活性。蛋白质共表达已导致大量生产出各种具有生物活性的复合物,足以用于生化、生物物理、结构研究和高通量筛选。
迈博睿生物研究了大肠杆菌共表达技术在蛋白质生产中的应用,并尝试从常见的二元表达扩展到更复杂的多表达。各种案例研究的结果表明,与内源纯化或体外重建单个表达组分相比,在大肠杆菌宿主中共表达是一种良好的替代方案。此外,多种蛋白质/复合物的共表达也已被证明是复杂且昂贵的表达系统(例如酵母、杆状病毒或哺乳动物细胞培养)的有效替代方案。
- 形成复合物的蛋白质共表达
- 二聚体或多聚体蛋白质亚基的共表达
- 蛋白质与分子伴侣和/或折叠酶的共表达
迈博睿生物提供不同策略的共表达服务:
- 从单个载体共表达:其优点是主要靶标和重折叠因子可以承载在单个质粒上。
- 单载体,单RNA转录本
- 单载体,多RNA转录本
- 不同载体共表达: 为确保质粒稳定性,载体应具有:
- 不同的选择标记,通常是抗生素抗性标记
- 不同的标签
- 不同的复制起点
- 上述两种方法的结合
此外,迈博睿生物还可以协助科学家进行蛋白质共表达网络分析,这是一种识别重要相互作用发生的组织和条件的有效方法。通过将共表达数据与蛋白质相互作用网络相结合,科学家将能够确定人类蛋白质相互作用网络的细胞条件和组织特异性。