介绍
实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）指的是在PCR进行的同时，对其过程进行监测的能力（即实时）。因此，数据可在PCR扩增过程中，而非PCR结束之后，进行收集。这为基于PCR的DNA和RNA定量方法带来了革命性的变革。在实时荧光定量PCR 中，反应以循环中首次检测到目标扩增的时间点为特征，而非在一定循环数后目标分子累计的扩增量。目标核酸的起始拷贝数越高，则会越快观察到荧光的显著增加。相反，终点法检测（也称 “读板检测”）测量的是PCR循环结束时累计的PCR产物量。
实时定量PCR的应用极其广泛，是分子生物学实验室的“标配”技术。常用于基因表达分析，microRNA表达分析，基因型分析（SNP检测）： 病原体检测与定量， 转基因检测及药物疗效评估等。实时定量PCR以其高灵敏度、高特异性、宽动态范围和高通量的特点，成为了基因表达定量分析不可或缺的工具。它将PCR从一种定性技术提升为了一个精密的定量平台，极大地推动了基础研究、医学诊断和药物开发等领域的发展。
实验流程
1. 获取cDNA;
2. PCR循环
3. 退火；
4. 数据分析 ；
