介绍
什么是microRNA（miRNA）？miRNA是一类内源性的、长度约为 18-24个核苷酸 的小型非编码RNA分子。它们在基因表达调控中扮演着关键角色，主要通过促使靶标mRNA降解或抑制其翻译来实现转录后调控。与较长的mRNA（通常几百至几千个碱基）相比，miRNA的反转录因其长度极短的特性，需要特殊的方法。
加尾法和茎环法是两种最主流的策略，它们通过不同的方式“延长”miRNA，为后续的qPCR检测铺平道路。茎环法： 使用一个与茎环序列互补的通用反向引物和一个与特定miRNA序列互补的特异性正向引物。加尾法： 使用一个与加尾引物锚定序列互补的通用反向引物和一个与特定miRNA序列互补的特异性正向引物。选择哪种方法取决于具体的研究目标：是进行大规模筛查还是对少数关键miRNA进行精确定量。
实验流程
1. 引物设计
2. 变性；
3. 退火；
4. 延伸 ；
