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等温滴定量热法

等温滴定量热法

简要描述:

等温滴定量热法 (ITC) 是用于测定溶液中相互作用热力学参数的金标准物理技术。该非标记技术基于对结合过程中吸收或产生的热量进行连续(滴定)的精确测量。与研究生

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详细介绍

等温滴定量热法 (ITC) 是用于测定溶液中相互作用热力学参数的金标准物理技术。该非标记技术基于对结合过程中吸收或产生的热量进行连续(滴定)的精确测量。

与研究生物分子相互作用的其他技术相比,ITC 具有以下几个优点:1)它不需要对结合伙伴进行任何化学修饰或固定,2)反应物的分子量不受限制,3)它不受反应物光谱性质的影响。

ITC反应池的配置和典型的ITC实验
图 1. ITC 反应池的配置和典型的 ITC 实验
(物理化学研究,2015 年)

在单个实验中,ITC 可以同时测定结合常数 ( K a )、反应化学计量 ( n ) 以及所研究相互作用的焓变 ( ∆ H ) 和熵变 ( ∆ S )。其原理是测量单位时间内维持样品池和参比池之间温度所需的功率。由于使用方便且量化能力全面,ITC 已广泛应用于许多研究领域:i) 蛋白质-配体相互作用。例如,蛋白质与各种配体(包括小分子、金属离子、药物、酶抑制剂)的相互作用。ii) 蛋白质-蛋白质相互作用。例如,域-域相互作用、蛋白质识别、激素-受体、抗体-抗原、抗体-受体结合和膜融合。iii) 自缔合。例如,水溶液中表面活性剂的胶束化参数。iv) 涉及生物医学和药物开发的其他化学和物理过程。

迈博睿生物的服务以我们对物理化学和结构生物学的最佳知识以及包括 MicroCal iTC200 在内的先进分析仪器为支撑。

迈博睿生物提供专业的等温滴定量热法测量一站式服务:

  • 灵敏度高,结合常数低至 nM;
  • 样本量低至 20 µM;
  • 从样品制备到数据分析的全套服务包装;
  • 定期进行 ITC 检测;
  • 数据拟合和解释;
  • 基于分子机制的量化和表征。

 


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