背景
介绍
迈博睿生物提供便捷的电泳迁移率变动分析 (EMSA) 服务,非常适合探索复杂的蛋白质-核苷酸相互作用。如果您正在研究基因调控、转录因子结合,或 DNA 修复和 RNA 处理的细节,这项服务将非常有用。他们负责处理从样品制备、核苷酸标记到电泳和数据分析的方方面面。因此,您可以信赖他们,获得一流的结果,真正推动您的研究进展。
什么是电泳迁移率分析(EMSA)?
EMSA 是一种实验室方法,可帮助研究人员发现和研究蛋白质与核酸的相互作用。基本原理是,取一个标记的核酸探针,将其与蛋白质样本混合,然后将其通过非变性凝胶电泳。如果蛋白质与探针结合,该结合物在凝胶中的移动速度会比游离探针慢,从而产生明显的谱带偏移。您可以使用放射自显影、荧光或化学发光等技术观察到这种偏移。这种偏移表明发生了蛋白质-核酸相互作用,从而为结合的特异性和强度提供了线索。
图1。EMSA示意图。
EMSA的应用
EMSA 在分子生物学和生物化学中非常有用:
- 基因调控和转录因子结合:通过 EMSA,研究人员可以检查转录因子如何附着于特定的 DNA 序列,从而深入了解基因调控。
- RNA-蛋白质相互作用:它对于研究 RNA-蛋白质相互作用非常方便,这对于掌握 RNA 处理及其稳定性至关重要。
- DNA 修复机制:EMSA 有助于揭示 DNA 修复蛋白如何附着在受损的 DNA 序列上,从而更清楚地了解 DNA 修复的工作原理。
- 药物筛选和靶点验证:它还用于寻找改变蛋白质-核苷酸相互作用的化合物,这对于药物发现和靶点检查很重要。
- 细胞信号通路:EMSA 可以分析细胞信号传导中的蛋白质-蛋白质相互作用,帮助我们了解细胞如何通讯。
服务流程
样品要求:
- 蛋白质样品:纯度>90%,浓度>0.3 mg/ml。
- 细胞/组织样本:细胞样本应包含>10 7 个细胞;组织样本应>100 毫克。
- 核苷酸:用作探针的核苷酸应亚克隆到质粒中并通过DNA测序进行验证,或提供核苷酸信息(基因名称、来源、GenBank登录号、序列等)。
可交付成果:
- 高分辨率 EMSA 数据。
- 详细的实验报告,包括结合亲和力和相互作用量化。
- 电泳带和结合相互作用的可视化。
服务详情:
核苷酸和蛋白质制备(可选) | 质量控制测试(如果质量控制失败,EMSA 将停止) | 核苷酸标记和纯化 | 核苷酸-蛋白质复合物的电泳 | 膜转移和紫外线交联(可选) | 信号检测 | |
关键点 | 核苷酸和蛋白质应储存在-20°C或-80°C下以保持稳定性。避免反复冻融,以防止降解。 | 如果质量控制失败,请通过检查样品制备方案、储存条件和试剂质量来排除故障。 | 确保标记和纯化完全,以避免 EMSA 结果中的背景噪音。 | 确保试剂正确混合并避免剧烈移液,以防止破坏蛋白质-核苷酸复合物。 | 使用干净的镊子和无粉手套处理膜,避免污染。确保均匀的紫外线照射,以防止交联不均匀。 | 按照制造商的说明,获得最佳检测条件。确保膜不要过度曝光,以防止信号饱和。 |
为什么选择 Profacgen?
- 最先进的平台:利用先进的技术平台获得高灵敏度和高分辨率的结果。
- 周转时间短:高效的工作流程确保快速交付结果。
- 有竞争力的价格:市场上最优惠的价格,同时不影响质量。
- 一致的结果:可靠且一致的结果,并附有详细的实验报告。
- 定制解决方案:量身定制的实验方案,满足特定的研究需求。