马（Equus caballus，horse），马科的一种有蹄食草哺乳动物 。它由一个物种组成，即Equus caballus ，其众多变种称为品种。成年性征通常在16-18个月时开始出现。根据品种的不同，马大约在3岁时成熟，在5岁时成年。繁殖力因品种而异，纯种马可能持续到20岁以后，其他马则可能持续到12-15岁。马妊娠期为11个月。一般来说，马妊娠期持续约 340 天，平均为 320-370 天，母马每次交配产下一只小马驹，偶尔产下双胞胎，很少产下三胞胎。小马驹在六个月时断奶。马是早熟物种，驹在出生后短时间内就能站立和奔跑。小马通常出生于春季。母马的发情周期大约每 19-22 天一次，从早春持续到秋季。小马驹通常在四到六个月大的时候断奶。
图1 马
马多克隆抗体自19世纪以来就已被生产和使用，用于治疗和预防白喉、结核病、破伤风和肺炎等疾病至今。马是实验及医学研究重要血清来源，同时也用于传染病的血清疗法。20世纪90年代，马抗体被重新发现，成为马免疫学的一个研究领域，从而导致了其相应基因和遗传组织的表征、同种型特异性单克隆抗体的产生，以及它们在抗体在多种马疾病和实验模型中的作用的深入分析中的应用。
图2 马血清
马抗体恒定区可由 11 种不同的重链 (IGH) 类（IGHM、IGHD、IGHA、IGHE 和 7 种 IGHG 亚类）和两种轻链（κ (IGK) 和 λ (IGL)）形成。在马科动物中，IGL 轻链表达占主导地位（约占循环 IG 的 95%），与绵羊、牛、狗和猫类似，而小鼠和兔子则以 κ 轻链同种型为主。
根据 IMGT 命名指南马 IGH 有56个 IGHV 基因（可变基因），分为 7 个亚组和一些假基因，40 个 IGHD 基因（多样性基因）分为 28 个亚组，8 个 IGHJ 基因（连接基因）分为两个亚组。 IGK 含有 60 个 IGKV 基因、5 个 IGKJ 基因和 1 个 IGKC 基因，而 IGL 基因座包含 144 个 IGLV 基因，分为 11 个亚组以及一些假基因、7 个 IGLJ 基因（分为 7 个不同的亚组）和 7 个 IGLC 基因。超过 90% 的抗体含有 λ 轻链，相当于 mRNA 和蛋白质表达的 λ:κ 比率为 13:1。
图3 马抗体重链基因信息
图4 马血清抗体浓度
马免疫实验流程：
（1）抗原的制备
抗原的数量取决于抗原的固有特性、抗原是否纯化或者是抗原混合物中的一种成分、所用的佐剂以及注射的途径和频率。
一般来说，需要微克到毫克数量的蛋白质抗原与佐剂结合才能在实验动物中引发高滴度血清反应，对于马一般免疫剂量为500-5000μg。
a.根据抗体用途设计制备抗原，可以使用重组蛋白，合成肽。
b.尽可能保持抗原生物学活性。
（2）动物种类的选择
通常使用4-6年的马。
（3）佐剂的选择和制备
弗氏完全佐剂 (FCA)、弗氏不完全佐剂 (FIA )。FCA用于首次免疫，常用于生产多克隆抗体。
（4）注射途径：
a.油性佐剂和粘稠凝胶佐剂抗原：皮下 (sc)、皮内 (id)一般使用较少
b.可溶性抗原或水性佐剂抗原：皮下 (sc)、皮内 (id)、肌肉内 (im)和静脉内 (iv)
（5）注射剂量：
a.油性佐剂和粘稠凝胶佐剂混合抗原：皮下 (sc)、皮内 (id)可以注射0.5ml；皮下 (sc)、皮内 (id)可以注射0.05ml。
b.可溶性抗原或水性佐剂混合抗原：皮下 (sc)可以注射2ml、皮内 (id)可以注射0.05ml、肌肉内 (im)可以注射2ml、一般腹膜内 (ip)不推荐注射，静脉内 (iv)可以注射30ml。
（6）注射部位数量：
使用抗原乳化剂时一般进行6-8个注射部位，最好后续在相同位点进行抗原/佐剂混合物注射
（7）加强免疫：
当首次免疫后，抗体滴度通常在2-3周达到峰值。使用乳化佐剂混合抗原也可以在第4周进行加强免疫，一般进行2-3次加强免疫
（8）抗体效价监测：
一般进行3-4次抗体效价检测，评估免疫效果，安全采血量500-7000ml
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