时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）是一种将时间分辨荧光（TRF）与福斯特共振能量转移（FRET）相结合的检测技术。TR-FRET在结合事件分析和高通量药物筛选领域有着广泛的应用。福斯特共振能量转移描述了两个荧光团之间的能量转移，以最初提出共振能量转移理论的德国科学家西奥多·福斯特（Theodor Förster）的名字命名。能量转移取决于两个条件。首先，供体和受体之间的空间接近度必须在20-90 Å范围内。其次，供体的发射光谱和受体的激发光谱必须重叠。
在生物学中，基因编码的荧光蛋白被广泛使用，包括绿色荧光蛋白 (GFP)、红色荧光蛋白 (RFP)、青色荧光蛋白 (CFP) 和黄色荧光蛋白 (YFP)。然而，标准 FRET 易受散射激发光和自发荧光产生的背景噪声的影响，难以获得高灵敏度的测量结果。时间分辨 FRET 采用时间分辨荧光，并引入了时间延迟检测来消除背景噪声。TR-FRET 依赖于镧系元素和短寿命荧光团之间发生的共振能量转移，可提供更高的稳定性和特异性，并且缓冲液或培养基干扰显著减少。由于这些优势，TR-FRET 被广泛应用于激酶测定、细胞信号通路、蛋白质-蛋白质相互作用、DNA-蛋白质相互作用以及受体-配体结合的研究。
图 1. FRET 和 TR-FRET 的原理 (Cottet, M.; et al. 2011)
服务
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