无细胞蛋白质合成 (CFPS) 系统作为一种快速有效的工具，已在基础生物学领域广泛应用数十年。迈博睿生物公司开发了多种基于细胞提取物的蛋白质表达系统，例如大肠杆菌无细胞表达系统、小麦胚芽无细胞表达系统、兔网织红细胞裂解物无细胞表达系统以及烟草无细胞表达系统。其中，兔网织红细胞裂解物（网织红细胞是一种高度特化的细胞，主要负责血红蛋白的合成）是一种高效的体外真核生物蛋白质合成系统，可用于翻译外源 RNA（天然或体外产生的 RNA）。
标准兔网织红细胞裂解物翻译系统中使用的 RNA 来源于使用 SP6、T3 和 T7 RNA 聚合酶启动子体外合成的转录产物，需要三个独立的反应，并且每个反应之间需要多个步骤。
兔网织红细胞裂解物无细胞蛋白表达系统实验方案：
- 兔网织红细胞裂解物的制备；
- 加入氨基酸、SP6、T3或T7 RNA聚合酶、能量物质，形成反应体系；
- 加入质粒DNA或PCR产物，在RNA聚合酶作用下体外合成mRNA，孵育检测；
- 利用细胞提取物中的转录因子、各种合成蛋白质所需的酶以及补充的氨基酸、能量物质、tRNA等将mRNA翻译成蛋白质，并纯化目的蛋白。
迈博睿生物现可为您提供TNT偶联的网织红细胞裂解物系统，该系统比传统的兔网织红细胞裂解物翻译系统翻译时间更短，蛋白表达量更高。这是一种单管偶联的转录/翻译系统，是指将转录产物直接掺入翻译混合物（包括RNA聚合酶、核苷酸、盐、RNasin核酸酶抑制剂）中，只需添加模板（PCR片段或质粒）和蛋氨酸（一般为放射性同位素标记）即可完成整个翻译过程。同时我们可以提供不同浓度的Mg2+和K+以及添加DTT的选项，以优化翻译过程。
兔网织红细胞裂解物无细胞蛋白表达系统的优势：
- 提取物制备体系简单，成本低廉；
- 细胞破碎容易，提取物制备快捷；
- 血红蛋白产量高，其他蛋白质产量中等或低；
- 蛋白质合成速率高，可实现同一体系内多种蛋白质同时表达
迈博睿生物的无细胞表达平台可以为您提供全面的技术服务，专注于目标蛋白的特殊性质，专业解决蛋白表达相关难题，例如蛋白产量低、特殊蛋白（如膜蛋白、毒性蛋白等）的表达、蛋白复合物的制备、多种不同蛋白的平行合成等。我们始终把您的需求放在第一位，如果您对结果有任何疑问，我们可以帮助您验证。Profacgen是您理想的合作伙伴。如果您对我们的服务感兴趣，欢迎随时联系我们获取更多信息。
