细胞活力测定用于测量细胞对细胞外刺激、化学药剂或治疗的反应的物理和生理健康状况,或确定细胞培养的最佳生长条件,并在筛选化合物、测量受体结合和信号转导研究中发挥重要作用。根据实验目的,您可以确定在实验中是否需要检测活细胞(细胞活力测定)或死细胞(细胞毒性测定)。活力测定被制药行业广泛用于评估候选药物对细胞的影响,特别是筛选已开发的针对癌细胞的疗法的结果。有几种常用的测定方法可根据细胞的各个方面(包括膜通透性、细胞功能和代谢活动)来确定活细胞的数量。不同的实验可以帮助您获得单参数或多参数读数,具体取决于实验目的。尽管分类不同,细胞活力测定可大致分为(a)染料排除测定,(b)比色测定,(c)荧光测定,(d)发光测定,和(e)流式细胞术测定。
我们的服务
从众多细胞活力检测方法中选择适合您研究目的的检测方法可能并非易事,因为确定最适合客户的检测方法需要清晰了解每种检测方法的具体内容、相关性和局限性。作为领先的生物技术服务提供商,迈博睿生物建立的细胞活力检测平台可以提供多种检测方法。
膜完整性
与胺反应的活性染料无法穿透细胞膜。在活细胞中,这些染料与细胞外的伯胺结合并发出微弱的荧光;在死细胞中,这些染料穿过细胞膜并与细胞内的胺蛋白结合,导致细胞荧光显著增强。
酶活性底物
活细胞蛋白酶活性在细胞死亡后迅速消失。酶活性底物不发荧光,与活细胞内的细胞酶或受损细胞释放的细胞酶发生反应,产生荧光或比色。
ATP测定
只有活细胞才能合成ATP,因此可以根据此规律来测定细胞活力。
图 1. ATP 测定原理示意图(Kamiloglu,S.;等人, 2020 年)
刃天青还原试验
刃天青是一种细胞通透性指示染料,其固有荧光极小。活跃代谢的活细胞可以将刃天青还原为试卤灵,后者呈粉红色并带有荧光。
四唑还原试验
利用活细胞中的氧化还原电位比色检测细胞活力。MTT转化为不溶性紫色甲臜产物,XTT转化为水溶性橙色甲臜产物。
图 2. MTT 还原为甲臜晶体 (Kamiloglu, S.; et al. 2020)
迈博睿生物在 PROATC 领域积累了丰富的经验。我们专业的技术团队能够为客户提供高质量的细胞活力检测及诸多相关的特色服务。我们极具竞争力的价格和丰富的专业知识赢得了合作伙伴的信任。请联系我们。