介绍
葡萄糖脑苷脂酶 (GCase) 由 GBA1 基因编码，具有溶酶体糖苷水解酶活性，可水解葡萄糖基神经酰胺。GCase 缺陷会导致葡萄糖基神经酰胺的积累，进而引发溶酶体贮积症，即戈谢病。功能缺失突变是突触核蛋白病（如帕金森病和路易体痴呆）最重要的遗传风险因素。近期对与溶酶体功能相关的帕金森病基因的研究表明，在帕金森病细胞模型和帕金森病患者来源的神经元中，GCase 活性降低。
本公司使用一种基于96孔板的细胞GCase活性测定方法，该方法基于Mazzulli等人报道的方法。该方案在酶促反应开始后90分钟内测定GCase活性的动力学，并分别在有或无选择性GCase抑制剂conduritol B环氧化物的情况下进行。溶酶体TRP通道TRPML1的激活刺激溶酶体胞吐，导致溶酶体GCase的释放。用TRPML1激动剂MK6-83处理细胞可降低细胞内的GCase活性。
实验流程
1. 细胞培养
2. 样品制备和 GCase 活性测定
实验特征
1. 高灵敏度
2. 高特异性
3. 操作简便，成本效益高
4. 通量灵活，易于优化
5. 定量准确
