蛋白激酶是一类催化蛋白质磷酸化的酶。它能将ATP中的磷酸转移，与特定蛋白质分子中某些丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基的羟基共价结合，从而改变底物蛋白和激酶的构象和活性。蛋白激酶可分为受体酪氨酸激酶、非受体酪氨酸激酶、丝氨酸/苏氨酸激酶、细胞周期依赖性激酶等。由于酶的本质是蛋白质，因此在运输和储存过程中，其状态的变化，包括阳光的变化、湍流、酸碱侵蚀等，都会导致其活性发生变化，从而影响实验结果或作用。理论上，任何能够检测磷酸化产物的方法都可以用于检测蛋白激酶的生化活性。但每种检测方法都需要根据激酶和底物的性质进行调整。
迈博睿生物提供的体外蛋白激酶检测方法包括放射性核素标记ATP法和荧光标记法（包括荧光偏振法、荧光共轭能量转移法、时间分辨荧光法和化学发光法），这些方法均以微孔板为载体，具有试剂消耗低、检测速度快、通量高的优势。
图1. 抑制剂抑制蛋白激酶活性的主要机制
蛋白激酶测定的常用方法及其优点：
1.放射性同位素法：包括膜过滤法和近闪烁计数法。
协议：
- 准备激酶底物，用捕获剂将其捕获在板表面。
- 将激酶和同位素标记的 ATP（γ-33P-ATP）加入到板孔中。
- 激酶反应过程中，33P掺入捕获的底物中，使33P进入微孔板闪烁体涂层，从而在微孔板闪烁计数器上检测到信号。或者，也可以通过离子交换纸滤膜结合法检测激酶活性。
优点：
1) 目前可用的大多数激酶蛋白；
2) 蛋白质与肽底物的良好结合能力；
3) 放射性核素灵敏度高，结果准确，被认为是蛋白激酶测定的金标准。
2. 均相非放射性同位素法：激酶反应后剩余的ATP用于将荧光素转化为氧化荧光素，荧光信号值与激酶活性成反比。对于一些非肽类底物和ATP酶，我们提供ADP偶联物或ADP抗体来检测蛋白激酶的活性。
优点：成本低、适合多种检测条件和激酶抑制剂（KI）的高通量筛选。
我们目前涵盖大多数激酶的体外蛋白激酶检测试剂盒，可为您提供全面的服务。迈博睿生物为您提供最广泛的激酶活性检测试剂盒，其准确性高，可帮助您获得准确、先进的结果和结论。
